聚合酶链反应检验实验室(PCR)是指通过基因扩增的方式检测特定的DNA 或 RNA 的检验实验室。
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是一种在体外特异性扩增靶 DNA序列的技术,其基本过程为模板双链DNA的变性、引物与模板DNA的退火和在DNA聚合酶引导下的链延伸反应三个阶段的多次循环。每一次循环后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板,理论上,扩增产物量呈指数形式上升,即经过n个循环后,产物量增加到2 n倍。PCR 试剂操作简单,短时间内在体外可获得数百万个特异靶DNA序列的复制,为临床疾病的诊断、治疗监测和预后评估提供了一种极有帮助的实验室辅助手段。
PCR实验室除了洁净间隔及通风系统的设计建造外,实验室常规4个功能间的配套仪器设备清单如下,供参考:
1. 试剂储存和准备区的功能:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。
配套用品一般应当包括:
(1)温度调控范围为 2℃~8℃和(或)-20℃以下冰箱;
(2)混匀器;
(3)微量加样器;
(4)紫外消毒设备;
(5)消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头;
(6)专用工作服和工作鞋(套);
(7)专用办公用品。
2.标本制备区的功能:核酸(RNA、DNA)提取、贮存及加样。
配套用品一般应当包括:
(1)温度调控范围为2℃~8℃和(或)-20℃以下冰箱;
(2)高速离心机;
(3)混匀器;
(4)水浴箱或加热模块;
(5)微量加样器;
(6)紫外消毒设备;
(7)生物安全柜;
(8)消耗品:一次性手套、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯);
(9)专用工作服和工作鞋(套);
(10)专用办公用品;
(11)如需处理大分子DNA应当具有超声波仪。
3. 扩增区的功能:DNA 合成、DNA 扩增及检测。
配套用品一般应当包括:
(1)核酸扩增仪;
(2)微量加样器;
(3)紫外消毒设备;
(4)消耗品:一次性手套、一次性帽子、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤芯);
(5)专用工作服和工作鞋;
(6)专用办公用品。
4. 扩增产物分析区的功能:扩增片段的进一步分析测定。
视检验方法不同而定,基本配置如下:
(7)微量加样器;
(8)紫外消毒设备;
(9)消耗品:一次性手套、一次性帽子、加样器吸头(带滤芯);
(10)专用工作服和工作鞋;
(11)专用办公用品。
设备的维护保养应当建立设备维护保养规程,计量设备应当定期检定。例如核酸扩增仪、微量加样器、生物安全柜、离心机应当每年进行检定或校准工作。